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青木生物技术（武汉）有限公司代理商
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代理商
青木生物技术（武汉）有限公司
入驻年限：7 年
- 联系人：
刘经理
- 所在地区：
湖北 武汉市 洪山区
- 业务范围：
体外诊断、细胞库 / 细胞培养、试剂、抗体、ELISA 试剂盒、实验室仪器 / 设备
- 经营模式：
代理商 经销商 生产厂商
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公司新闻/正文
Candor推荐ELISA实验设置优化流程
409 人阅读发布时间：2022-04-12 17:00
1. 抗体包被
- 用Coating Buffer 1x(Cat# 120 or 121 , 0.1 - 10 µg/mL)稀释抗体
- 每孔加入100-150 µL
- 孵育：室温下孵育1-4 小时，或 4°C 过夜
Coating Buffer不含任何影响抗体固定的添加物。
洗涤
-加入200-300 µL Washing Buffer 1x (e.g. Washing Buffer 10x TRIS, Cat# 145)，洗涤 3-5 次
2. 封闭和稳定
使用表面封闭剂进行微孔板封闭 (The Blocking Solution, Cat# 110, SmartBlock™, Cat# 113,BSA-Block, Cat# 115)
- 每孔加入200 µL
- 孵育：室温孵育 1-2 小时
- 加入200-300 µL Washing Buffer 1x (e.g. Washing Buffer 10x TRIS, Cat# 145)，洗涤3-5 次
为保持包被ELISA板的长期稳定性，额外的稳定操作步骤也是必要的。 (e.g. 工业化ELISA试剂盒的生产) 稳定
- 每孔加入200 µL Liquid Plate Sealer®, Cat# 160
- 孵育：室温下孵育15-90分钟
- 移除溶液
微孔板可干燥密封保存1-3年 (2-8°C)。
3. 加样或校准
加样，用样本稀释液稀释样本。
LowCross-Buffer®可帮助降低干扰，如交叉反应、基质效应和非特异性结合。最小化负面影响，提高检测质量， 从而提高实验结果的可靠性。Assay Defender®相较于LowCross-Buffer®，能更加有效地去除因样本中抗体造成的干扰，如HAHA、HAAA、AAA、类风湿因子等。在无任何干扰存在的检测中，可以使用Sample Buffer。
校准品可采用Antibody Stabilizer, Cat# 130 or 131保存， 2-8°C存储。系列稀释比例与样本保持一致。
- 每孔加入 100-150 µL
- 孵育：室温下孵育30分钟
洗涤
-加入200-300 µL Washing Buffer 1x (e.g. Washing Buffer 10x TRIS, Cat# 145)，洗涤 3-5 次
4. 加入标记抗体 + 检测
加入标记抗体 (HRP, 辣根过氧化物酶; AP, 碱性磷酸酶或其他).
即用型标记抗体采用 HRP-Protector™, Cat#222 (适用于 HRP标记的抗体 ), AP-Protector®, Cat#235 (适用于AP标记的抗体) or LowCross® HRP-Stab, Cat# 270 (适用于 HRP标记的抗体 )，2-8°C长期保存。加入这些稳定剂后，抗体结合物可以溶液状 态在2-8°C长期储存。
稳定剂能保护抗体和酶。
如果不使用稳定剂，检测抗体也是可以用LowCross-Buffer® 或Sample Buffer进行稀释。
- 每孔加入100-150 µL
- 孵育：室温下孵育2-4小时
- 加入200-300 µL Washing Buffer 1x (e.g. Washing Buffer 10x TRIS, Cat# 145)，洗涤3-5 次
*上述浓度和孵育时间仅供参考，可根据具体检测情况做调整。