经典荧光素原料（三）—— 高性价比PerCP

114 人阅读发布时间：2025-11-03 14:28

在流式细胞术（Flow Cytometry, FCM）、免疫荧光成像、微球阵列技术、体外诊断等多种领域中，荧光染料是实现细胞标记和信号检测的核心工具。其中PE（藻红蛋白）、APC（别藻蓝蛋白）、及 PerCP（多甲藻黄素-叶绿素蛋白复合物） 是常用的荧光染料，主要用于偶联抗体，实现对细胞表面或胞内分子的特异性检测或定位。

三、多甲藻黄素 - 叶绿素蛋白复合物（Peridinin-Chlorophyll-Protein Complex, PerCP）

PerCP 是一种从甲藻（如 Amphidinium carterae）中提取的天然色素复合物，因发射远红光、光谱独特，主要用于多色流式的 “补偿通道” 或 “高表达抗原标记”。

1. 基础背景

• 来源与结构：由多甲藻黄素（Peridinin，一种类胡萝卜素）、叶绿素 a（Chlorophyll a）和蛋白质组成的复合物，核心是 Peridinin 吸收光后将能量传递给叶绿素 a，最终由叶绿素 a 发射荧光；

• 光谱特性：

◦ 激发波长：主要激发光为 488 nm，与 FITC、PE 共享激发光源；

◦ 发射波长：最大发射峰约 675 nm（远红光），信号可被 670/30 nm 滤光片捕获。

2. 性能优势与局限：

◦ 优势：发射波长在远红光区，与 FITC（525 nm）、PE（576 nm）的光谱重叠极少，适合多色搭配；

◦ 局限：

▪ 荧光亮度低：仅为 PE 的 1/5-1/10，远低于 APC，不适合低表达抗原；

▪ 光稳定性差：易发生光漂白，需快速检测，不适合长时间实验；

▪ 易聚集：与抗体偶联后易形成聚集体，可能导致非特异性染色。

3. 主要应用

PerCP 因亮度低、光谱独特，应用场景相对局限，主要用于高表达抗原标记和多色补偿：

• 高表达抗原的多色标记：仅用于标记 “极高表达” 的分子（如白细胞通用标志物 CD45-PerCP、T 细胞标记 CD3-PerCP），因高表达可弥补亮度不足的问题；

• 多色流式的补偿调节：在 4-6 色实验中，PerCP 常作为 “远红通道”，与 FITC（绿）、PE（橙）、APC（红）搭配，减少各通道间的光谱重叠（如 PerCP 与 APC 发射波长接近，需轻微补偿，但与 PE 无重叠）；

• 替代方案对比：因亮度和稳定性不足，PerCP 逐渐被 PerCP-Cy5.5（PerCP 与 Cy5.5 串联，亮度提升 3-5 倍，发射 710 nm）取代，目前仅在传统实验或低成本需求中使用。

以上三种荧光染料综合来讲：

• 天然染料（PE/APC/PerCP） 是直接用于检测的 “基础工具”，亮度和光谱决定其应用场景（PE 通用、APC 高亮度、PerCP 远红）；

• 活化修饰（活化 PE / 活化 APC） 是 “原料工具”，用于制备标记抗体，服务于定制化实验；

• 交联修饰（clAPC） 是 “增强工具”，通过多聚化提升亮度，满足jizhi检测需求。

在实际实验中，需根据抗原表达水平、激发光源、多色搭配需求选择合适的染料，例如：低表达抗原选 APC/clAPC，高表达抗原选 PerCP，通用场景选 PE。

Home Algae Biotech（鴻藻生技股份有限公司）是一家国立海洋大学技术支持，坐落于中国台湾北部临海的藻类应用技术开发公司，于2020 年获科技部「新型态产学研链结—价值创造计划」研究经费补助，拥有自己的藻类种原库及规模养殖系统。团队成员专精于海藻选种、育种与规模养殖技术，后端富有蛋白质活性成分纯化萃取、抗体接合，及保健品开发等研发能量，生产流程取得 ISO9001 质量管理系统认证。

公司主产品「天然荧光标记蛋白」为现代生物医学研究及临床领域，如细胞观测、细胞分选（例：循环肿瘤细胞检测 (CTC)、细胞治疗）所不可或缺的试剂，其次，公司所生产之藻类萃取原料完成国际化妆品命名协会 (INCI) 登录，经工研院原料安全及功效测试报告支持，为美妆保养、保健营养品产业中越渐热门的配方选择。公司现为台湾抗体协会、英国 Pivotal Scientific Limited PSL Alliance 生技联盟成员。